心臓オルガノイドのカルシウムイメージング
蛍光カルシウム指示薬を用いて、心臓オルガノイドと心臓様組織のカルシウムシグナルの変化を観察します。局所的なトランジェント、領域間の活動の一致度、薬物処理後の機能応答を解析し、三次元心筋モデルの特性評価と薬理研究に役立てます。
測定・解析項目
| 項目 | 主な内容 |
|---|---|
| 時間的な動態 | カルシウムトランジェントの振幅、立ち上がりと減衰、頻度、一拍ごとの変動を解析します。 |
| 領域間の比較 | 関心領域ごとのシグナル強度の変化、活性化のタイミング、活動の一致度を比較します。 |
| 空間的な伝播 | 空間分解能、取得速度、シグナル品質が十分な場合に、伝播の特性を解析します。 |
| 薬物応答 | 処理前後、または異なる濃度・曝露時間で、カルシウムシグナルの表現型を比較します。 |
蛍光シグナルは組織の厚さ、プローブの分布、動きの影響を受けます。評価結果は実際に観察できた領域に対応するものであり、三次元組織全体が均一な状態にあると直接外挿することはできません。
カルシウムイメージングの例
他の機能評価との組合せ
カルシウムイメージングは、心臓オルガノイドの機能評価を構成する一つの手法です。パッチクランプによる活動電位記録、膜電位イメージング、収縮測定、電気活動・カルシウム・収縮の連関解析を組み合わせることで、カルシウムハンドリングの変化と他の機能過程との関係を検討できます。測定法の組合せはモデルへの適合性を確認して選択し、すべてのモデルで各シグナルを同時に取得することを意味するものではありません。
試験計画と納品内容
研究目的に応じてモデル、処理濃度、曝露時間、対照条件、反復数を設定します。試料の状態と品質管理情報を踏まえて解析します。
- 試料の状態、プローブ、取得条件、関心領域の説明。
- 代表的な画像とカルシウムトランジェント波形、合意した機能パラメータ、領域間の比較。
- 他の機能指標との関連解析、およびサンプリング上の限界の説明。
